Стремежът на науката в световен мащаб да отговори адекватно и бързо на диагностичното предизвикателство - новият коронавирус - SARS-COV-2, доведе до бързото разработване на редица диагностични тестове както за неговото откриване, така и за оценка на имунния отговор на организма след преболедуване или имунизация. Така, година след началото на пандемията, вече се сблъскваме с проблема за правилното използване и интерпретация на резултатите от различните тестове за антитела срещу SARS-COV-2, както и с въпросите: "Кой тест да избера?", "Кой от всички предлагани антителни тестове е най-подходящ за мен?
За да могат пациентите на лаборатория "ЛИНА" да направят своя правилен и информиран избор на необходимия за тях тест за антитела спрямо SARS-COV-2, ще направим кратък преглед на видовете тестове, предлагани в лабораторията и тяхното приложение.
Антителните тестове, наричани серологични тестове, показват наличието или отсъствието на специфични имуноглобулини от класовете M, G и A, които имунната система на организма изработва срещу различни антигенни съставки на вирусната частица. Коронавирусната частица е изградена от няколко структурни белтъка - S (spike)- шипчест, E (envelope)– белтък на обвивката, M (membrane)– мембранен и N (nucleocapsid)- нуклеокапсиден. Установено е, че най-имуногенни са шипчестият и нуклеокапсидният белтътъци, затова и повечето тестове са разработени да откриват антитела насочени срещу тях. Различните класове имуноглобулини имат определена хронология на появата си в кръвта, като това може да е ориентир за давността на инфекцията.
Лаборатория "ЛИНА" предлага следните антителни тестове:
Това е бърз качествен тест за определяне на наличието или отсъствието на антитела от класовете М и G / разделно/. Резултатът се изразява като "положителен" или " отрицателен". Бързите тестове са едни от първите разработени антителни тестове, които все още намират приложение, тъй като изследването се извършва лесно и в кратки срокове може да се получи резултат поотделно за присъствието или не на антитела от посочените класове. Недостатък на този вид анализ е субективното отчитане на резултата и по-ниската чувствителност, но все още намират приложение.
2. Anti-SARS-CoV- 2 ELISA ( Ig A) - цена - 30лв.
При този тест се прилага високо чувствителен и специфичен имуноанализ /ELISA / за полуколичествено откриване на антитела от клас IgA срещу S1 субединицата на шиповия протеин на SARS-CoV-2 в човешка кръв. Това е най-рано появяващото се антитяло, още на 2-3 ти ден от началото на симптомите. SARS-CoV-2 може да прониква в клетките основно през ресничестия епител на горните дихателни пътища. IgA е преобладаващият имуноглобулин, експресиран в лигавицата. Серумни IgA антитела могат да бъдат открити по-рано от IgG и IgM и се задържат най-малко 38 дни след инфекцията.
Кога има смисъл да се назначава? При търсене на ранен хуморален отговор на заразени с вируса и при случаи, в които разултатът за IgM на доказано инфектирани пациенти е все още отрицателен. Сероконверсията на IgM е доста вариабилна и поради тази причина търсенето на антитела от клас Ig A е основателно в ранния период на инфекцията.
3. Anti-SARS-CoV- 2 ELISA ( Ig G) - цена - 30лв.
При този тест се използва същият ензимно свързан имунологичен анализ, който се извършва на автоматизирана ELISA система, което значително подобрява качеството и надеждността на получените резултати. Аналогично на предходния тест се откриват антитела, но от клас IgG срещу S1 субединицата на шиповия протеин на SARS-CoV-2 в човешка кръв. Резултатът е полуколичествен и се изразява като цифрова стойност, която може да попадне в един от трите диапазона - отрицателен, граничен и положителен.
Кога да се назначава? - След 12-15 ти ден от началото на коронавирусна инфекция. Наличието на тези антитела показва, че организмът се е срещал с този причинител, но отрицателният резултат не изключва възможността за активна инфекция.
Ig A и Ig G по ELISA се предлагат в пакет - Anti-SARS-CoV- 2 ELISA ( Ig G+ Ig A ) на обща цена от 50лв.
Това е много полезен скринингов тест за откриване едновременно на антитела от двата класа Ig M и IgG, които са насочени към нуклеокапсидния антиген. Този белтък е разположен в сърцевината на вирусната частица и има отношение към размножаването на вируса в инфектираните клетки. Едновременната детекция на двете антитела е предимство в ранния етап от хода на инфекцията, поради вариабилната поява на IgM в този период. Тестът показва висока чувствителност до 70% на 3-6 ден от потвърждаване на инфекцията с PCR и достига до 100% след 14-я ден.
Предимствата на теста се изразяват в това, че е напълно автоматизиран и стандартизиран, използва се високочувствителен електрохемилуминисцентен метод на интегрирана аналитична система Cobas 6000. Това дава изключителна сигурност на резултатите. Те се изразяват като "положителен" или "отрицателен".
Кога да изберем този тест? - Подходящ е при всички случаи на съмнение за прекарана коронавирусна инфекция /безсимптомна форма или с неубедителни признаци за COVID-19; със знаен или незнаен контакт с положителен пациент/, както и при съмнителни за COVID-19 симптоми и с отрицателен PCR тест с давност повече от 10 дни.
Подходящ е за тестване на големи групи от хора / работни колективи / за бързо установяване на наличие или не на имунен отговор към SARS-COV-2, както и за големи епидемиологични изследвания, целящи да установят процента на населението, изложено на вируса при липса на диагноза, извършена с молекулярни тестове.
Този тест дава количествен израз на наличието на IgG антителата, насочени към S1/S2 антигените на SARS-COV-2. Антигенната структура S1/S2, разположена на шипа на коронавируса, играе основна роля за проникването му /S1 / и сливането /S2 / с клетката- гостоприемник. Затова, антителата, образувани срещу S1/S2 на шипа, блокират, неутрализират проникването му в клетката и по този начин предотвратяват разпространението му в организма. Тези антитела се наричат още вируснеутрализиращи и тяхното образуване се цели при всички ваксини, а изследването им дава информация за това, дали са образувани достатъчно количество предпазни антитела, които наистина да осигурят защита на организма при последваща среща с този причинител.
Предимства на теста SARS-COV-2 IgG Quantitative ( количествен ) - получава се бърз, количествен израз на голяма част от антителата с вируснеутрализираща активност. За тяхното определяне се използва високочувствителен, напълно автоматизиран хемилуминисцентен анализ на апарат Liasaon XL.
Кога се назначава? Максималната чувствителност на теста се постига след 15-я ден от началото на симптомите, затова по-ранното му изследване не е препоръчително. Оптимално е да се направи на 38-40-я ден след преболедуване от COVID-19 инфекция. Подходящ е за проследяване на имунния отговор след поставяне на ваксина не по-рано от 2 седмици /оценка на ваксиналния отговор/. Използва се и за проследяване нивата на антителата с цел обсъждане на необходимостта от последващо ваксиниране. Подходящ е за определяне на количеството антитела при желаещи да станат донори на конвалесцентна плазма.
6.SARS-COV-2 IgМ Liason XL - цена 19 лв
Това е напълно автоматизиран тест за качествено определяне на специфични IgM антитела срещу SARS-CoV2 използващ хемилуминесцентен имуноанализ (CLIA) на платформа Liason XL на фирма Diasorin
Откриването на тези антитела е свидетелство за ранна инфекция с коронавирус. Появата им може да бъде установена средно не по-рано от 10 дни след заразяване /симптомно или безсимптомно/.
В какви случаи е подходящ този тест? Търсенето на IgМ антитела срещу SARS-CoV-2 може да се използва за оценяване на имунния статус на пациентите, засегнати от CoVID-19, както и като допълнителен неинвазивен метод за откриване на заболяването, особено при пациенти, които проявяват симптоми късно и с ниско вирусно натоварване. Въпреки това резултатите от теста SARS-COV-2 IgМ Liason XL не трябва да се използват като единствена основа за диагностициране или изключване на инфекцията.
Този тест се отличава от предходните по това, че дава представа за биологичната активност на придобитите по естествен начин /в резултат на преболедуване / или след ваксинация антитела. За разлика от количествените тестове за вирус неутрализиращи антитела, които измерват антителните молекули, този тест оценява колко ефективни са те при блокиране на разпространението на вируса и дали осигуряват необходимата защита на организма. От всички вирус неутрализиращи антитела, най-силна блокираща способност имат тези, които са насочени към един малък участък от спайк протеина, отговорен за свързването му с АСЕ2 рецепторите в дихателните пътища. Той се нарича рецептор свързващ участък /RBD/. С този тест се определя точно тяхната неутрализираща активност.
Кога да се назначава? - Тестът не е скринингов за неутрализиращи антитела. Подходящ е за хора:
преболедували инфекцията, при които количествено са установени IgG антитела, за да се определи тяхната функционалност,
след ваксиниране - 2 седмици след поставяне на втората доза,
проследяване нивата на вирус неутрализиращите антитела, с цел обсъждане на необходимостта от ваксинация или реваксинация
донори на конвалесцентна плазма
Резултатът е готов след 10 дни.
8.Скринингов тест вирус неутрализиращи SARS-CoV-2 антитела – цена-23 лв.
Това е качествен имунохроматографски тест за откриване на вирус неутрализиращи антитела. Скринингов метод. Резултатите се изразяват като „положителен“ и „отрицателен“. Предимството на теста е, че резултатът се получва в рамките на същия работен ден, за разлика от предходния тест, при който поради спецификата на използваната методика това става до 10-14 дни.
За кого е подходящ? За всички, които искат:
Бързо да получат отговор на въпроса дали са изградили вирус неутрализиращи антитела след преболедуване / симптомно или безсимптомно/, поне месец от началото на инфекцията,
За ваксинираните, непосредствено преди и след 2-рата игла /2 седмици след поставянето на втората доза,
Скринингово изследване на колективи, при които има доказани положителни PCR резултати и определяне на защитните вируснеутрализиращи антитела на контактните не по-рано от 20 дни от началото на карантината.
Всеки от тези тестове има своето приложение в диагностиката на COVID-19, тъй като тя продължава да се разширява и усъвършенства. Следващата седмица медицинска лаборатория „ЛИНА” ще въведе и тест за клетъчен имунитет срещу SARS-CoV-2. Информация за него ще бъде обявена на сайта www.lina-bg.com.